PCR實驗室的裝修與設(shè)計
一、PCR實驗室的裝修
PCR實驗室裝修的功能區(qū)劃分,建議從3方面來考慮,即:普通實驗區(qū)、污染控制區(qū)、氣流組織。
1、普通實驗區(qū):包括產(chǎn)物分析區(qū)、擴增區(qū)、標本制備區(qū)、試劑準備區(qū)這4個區(qū)域。
2、污染控制區(qū):此區(qū)域的規(guī)劃有3套方案,第1套為各功能間相互連通,以套間方式進入人流/物流;第2套為設(shè)置獨立緩沖間,人流/物流分道,流程相鄰間設(shè)置物流傳遞窗;第3套為設(shè)置共用緩沖間/緩沖走廊。
3、氣流組織:PCR實驗室裝修的氣流組織需要從原始試劑混配室、DNA提取室、PCR擴增室、檢測室、送風(fēng)口這5方面來考慮。
①原始試劑混配室:房間壓差為正壓,配備有潔凈工作臺,以防止其他功能間對本房間的污染。
?、贒NA提取室:房間壓差為負壓,配備有排風(fēng)系統(tǒng),以防止提取核酸產(chǎn)生的氣溶膠對工作人員的傷害及擴散污染。
③PCR擴增室:房間壓差為負壓,與DNA提取室一樣,配備有排風(fēng)系統(tǒng),以防止擴增產(chǎn)物造成的擴散污染。
?、軝z測室:房間壓差為負壓,與DNA提取室、PCR擴增室一樣,配備有排風(fēng)系統(tǒng),以防止相關(guān)污染。
?、菟惋L(fēng)口:采用的是頂送風(fēng),側(cè)下回/排風(fēng)方式。
二、PCR實驗室的設(shè)計
這里重點介紹PCR走廊、傳遞窗這兩方面的設(shè)計。
1、PCR走廊:并不是標配,進深不夠時不要做PCR走廊,且PCR走廊會增加交叉污染。
這4個分區(qū)(試劑儲存和準備區(qū)、標本制備區(qū)、核算擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū))原本就不需連接在一起。且在物理空間上必須是完全相互獨立的,各區(qū)域無論在空間上還是在使用中,應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分隔狀態(tài),不能有空氣的直接相通。
2、傳遞窗:并非必須設(shè)置(只要不涉及潔/污分流就不需要設(shè)置傳遞窗),但一般實驗機構(gòu)/實驗人員喜歡設(shè)置。
傳遞窗的本質(zhì)——同緩沖間,是物流的緩沖間。在PCR實驗室設(shè)計中,試劑準備和標本制備間是重點保護的區(qū)域,此處*好不要加傳遞窗,防止交叉污染。實驗中的污染風(fēng)險主要來自于核酸擴增時的加樣行為,但由于操作在生物安全柜(起超凈臺的作用,*新做法)內(nèi)進行,且確保空氣不外溢,因此不存在污染。
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